總大腸菌群 | 濾膜法與紙片快速法

2023-12-15 14:11 
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總大腸菌群是作為糞便污染指標菌提出來的,主要是以該菌群的檢出情況來表示水中是否有糞便污染??偞竽c菌群數(shù)的高低,表明了糞便污染的程度,也反映了對人體健康危害性的大小。糞便是人類腸道排泄物,糞便內(nèi)除一般正常細菌外,也會有一些腸道致病菌存在(如沙門氏菌、志賀氏菌等),因而水中有糞便污染,則可以推測該水存在著腸道致病菌污染的可能性,必須看作對人體健康具有潛在的危險性。

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圖 1 總大腸菌群(來源網(wǎng)絡(luò))

目前,用于檢測大腸菌群的方法有多管發(fā)酵法、濾膜法、紙片快速法酶底物法等。是小編發(fā)現(xiàn)在行業(yè)存在將濾膜法和紙片快速法弄混的現(xiàn)象,認為紙片法是不用抽濾的濾膜法,其實這是兩個完全不同的檢測方法,今天我們來了解一下這兩個方法的基本原理、操作步驟及優(yōu)缺點等。


濾膜法

檢測原理

用孔徑為 0.45 μm 的微孔濾膜過濾水樣后,將濾膜貼在選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)后,能形成典型菌落經(jīng)革蘭氏染色和證實試驗,來檢測水中總大腸菌群的方法。

檢測步驟

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圖 2 濾膜法操作步驟


紙片快速法

檢測原理

按最大可能數(shù)(MPN)法,將一定量的水樣以無菌操作的方式接種到吸附有適量指示劑(溴甲酚紫和2,3,5-氯化三苯基四氮唑即TTC)以及乳糖等營養(yǎng)成分的無菌濾紙上,在特定的溫度(37℃)培養(yǎng)18-24h,當細菌生長繁殖時,產(chǎn)酸使pH值降低,溴甲酚紫指示劑由紫色變黃色,同時,產(chǎn)氣過程相應的脫氫酶在適宜的pH范圍內(nèi),催化底物脫氫還原TTC形成紅色的不溶性三苯甲臜(TTF),即可在產(chǎn)酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點(或紅暈)。通過上述指示劑的顏色變化就可對是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作出判斷,從而確定是否有總大腸菌群存在,再通過查MPN表就可得出相應總大腸菌群的濃度值。

檢測步驟

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圖 3 紙片法操作步驟(目標水樣、空白、陰性、陽性均按此步驟)

注意由于飲用水含菌量低,在使用紙片快速法是應培養(yǎng)足夠的時間方可得到準確的結(jié)論。另外水質(zhì)樣品色度變化會干擾紙片法的陽性紙片判讀,隨著水質(zhì)樣品色度的增加,可判讀的陽性紙片數(shù)會逐漸減少。


兩種方法比較

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